冷冻保存

将东西进行低温处理保存

冷冻保存是将东西冷冻保存，精液保存主要是将精液冷冻保存，是将人的精子用速冻法或缓冻法冷冻1年时间。冷冻保存应用于很多的领域如中国古代的地窖和现代的冰箱。它们的主要功能都是冷冻保存。

冻存方式

将体外培养物悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速率降至零下某一温度，并在此温度下对其长期保存的过程。

按照冷冻保护液在冻结后是否形成冰晶来划分，冻存方法可分为非玻璃化和玻璃化冻存两种。

非玻璃化

非玻璃化冻存是利用各种温级的冰箱分阶段降温至-70℃~-80℃，然后直接投入液氮进行保存；或者是利用电子计算机程控降温仪以及利用液氮的气、液，按一定的降温速率从室温降至-100℃以下，再直接投入液氮的方法，以该种方法冻结的细胞悬液或多或少都有冰晶的形成。

玻璃化

玻璃化冻存则是指利用多种高浓度的冷冻保护剂联合形成的玻璃化冷冻保护液保护悬浮细胞，直接投入液氮进行冻存的方法，以该种方法冻结的细胞悬液没有冰晶的形成，细胞冻存是最常用的仍是前一种方法。

精液保存是体外受精、人工受精培育动物的一个关键问题。目的在于延长精子在体外的存活时间，通过运输扩大使用范围。精液保存分为常温保存（15-25℃）、低温保存（0-5℃）、冷冻保存（-79℃、-196℃）3种。

卵母细胞的冷冻保存比精子和胚胎困难。冷冻后卵母细胞的线粒体、微管、囊泡等亚细胞结构会受到损伤，冷冻保护剂也会促使透明带过早硬化。如果冷冻造成了卵母细胞亚细胞结构的损伤，会影响到卵母细胞复苏后的质量。

方法及应用

借鉴胚胎冷冻方法卵母细胞的冷冻技术得以建立。1986年人的成熟卵母细胞冷冻获得成功。1992年日本游冷冻的牛成熟卵母细胞体外受精成功获得牛犊。具体方法包括：缓慢冷冻法、一步冷冻法、玻璃冷冻法、超快速冷冻法等，其中缓慢冷冻法由于费时、冷冻剂对卵母细胞损伤大而已经基本不使用。玻璃化冷冻法是使用比较广泛的卵母细胞冷冻保存方法。

与保存精子相比，胚胎冷冻保存具有优越性，可以移植给任何品种获得纯种后代。与鲜胚移植相比，胚胎冷冻保存便于胚胎的运输和移植，但是面临着生产率比较低、流产率较高等不足。关于冷冻对细胞核、细胞形态和代谢上的影响以及胚胎冷冻基础研究还比较欠缺。但是，牛、兔、绵羊、山羊、大鼠等的胚胎均已实验超低温冷冻长期保存。迄今已经有20多种动物的胚胎经冷冻后移植至受体而成功获得后代。

胚胎冷冻技术为建立优良品种的胚胎库提供条件，还可以长期保存珍贵或濒临灭绝的动物资源。

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