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基因扩增方法

含有特定基因的DNA片段的拷贝数大量增加的方法

基因扩增方法是使含有特定基因的DNA片段的拷贝数大量增加的方法。可分为体内和体外两种情况。在体内可利用质粒作载体，通过重组质粒的大量拷贝使克隆的外源基因得以扩增。添加氯霉素可使某些质粒的含量达到2毫克/升培养液。也可以利用病毒载体，通过重组病毒在细胞中大量繁殖使基因得以扩增。

在体外是用DNA体外酶学扩散法，该法要求待扩增DNA(靶DNA)区域的两侧顺序已知，然后人工合成引物。在含有靶DNA的溶液中加入大量引物，经变性退火后，加入DNA聚合酶和dNTP进行合成。重复以上步骤，可使靶DNA的数量剧增。此外，还可用该法将限制性内切酶切点等序列引入。1985年以来在重组DNA技术中得到广泛应用，但所能合成的片段较短，复制错误率比在体内要大。
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