抗生素检测

能抑制和杀灭细菌的药物

抗生素作为一种能抑制和杀灭细菌的药物,已被广泛用于医疗卫生、畜禽养殖、农业生产等行业,为社会的经济发展做出了很大的贡献。在畜禽养殖业抗生素主要是作为饲料添加剂,用于预防和治疗动物的疾病以及促进动物的生长。但是畜禽养殖业中抗生素的不合理应用的现象已经很普遍,所以需要抗生素检测手段来规范这种现象。

原因目的
我国是抗生素的生产和使用大国,据统计每年约有6000t抗生素用于饲料添加剂,75%的抗生素不被动物机体吸收而随动物粪便排出,导致畜禽养殖废水成为自然界水体环境中抗生素污染的主要来源。
抗生素残留对人体健康有着十分严重的危害,包括“三致”(致癌、致畸、致突变)作用、人体对此类药物的长期暴露,通常不会造成急性中毒,而主要是引起慢性中毒。
鉴于抗生素的危害,欧盟已于2006年初全面禁止在农业中使用以促进生长为目的的抗生素。2000年丹麦政府下令,所有动物,无论大小,一律禁用抗生素饲料。美国在这方面的监督和管理也越来越严格。关于饲料中添加抗生素,我国也有严格的法规:只有30多种人畜不共用的抗生素,可作为促生长剂添加于饲料中,且对于不同动物不同的生理阶段所使用抗生素的种类、剂量以及停药期都有严格的规定。尽管如此,养殖户滥用抗生素的现象依然难以监控,一方面是由于我国的法律法规不健全,监管力度不够;另一方面是由于养殖户为了增加收益,提高产量,缩短养殖周期,还在大量的使用抗生素。抗生素污染已被视为一类新型的重要的水体污染物而成为国际研究的前沿课题。因此,为了更好的了解畜禽养殖废水中抗生素对自然界水环境和人类健康的影响,建立一种灵敏、快速、高效、可靠定性定量检测方法是十分重要的。
主要方法
由于抗生素在废水中的浓度相对较低,所以抗生素的检测一般都是微量或是痕量分析,常采用具有高灵敏度的仪器进行检测。各研究机构对畜禽废水中抗生素的检测技术主要有色谱法和其联用技术、酶免疫分析法、毛细管电泳法等。
色谱分析方法
液相色谱法(LC)在废水抗生素的检测中是最常见的,LC具有分离效能好,检测速度快且重现性好的特点。LC法所用的检测器有紫外检测器(UV),荧光检测器,以及二级管阵列检测器。
高效液相色谱-紫外检测器联用检测技术是最早用于环境中抗生素的分离检测,由于其操作简便以及成本低,被用于畜禽废水中抗生素的检测。
液相色谱-荧光检测器
液相色谱-荧光检测器因为其检测限低所以也被用于畜禽废水中抗生素的检测,通常对本身具有荧光性的抗生素液相色谱-荧光检测器可以直接检测出,但是对于本身不具有荧光性或荧光性差的抗生素,需要对其衍生化来提高目标物的荧光特性以便检测。
液相色谱串联质谱技术
色谱可以用于多组分混合物的分离和分析,可以对有机化合物进行定量分析,但是定性较困难,质谱仪能够对单一组分提供高灵敏度和特征的质谱图,但对复杂化合物无分析能力。所以将色谱与质谱进行联用(或是串联质谱),对复杂化合物中微量和痕量组分的定性和定量分析具有重要的意义。
由于畜禽废水中有多种类的抗生素同时存在,利用色谱和质谱的联用技术可以提高抗生素的定性、定量分析的可靠性、准确性、灵敏度。
酶免疫分析方法
酶免疫分析方法具有操作简单,前处理简化,分析成本低、灵敏、特异性强、检测快速,不需要昂贵的仪器等,而且可以同时测定几个样品,但是酶免疫分析方法对试剂的选择性高,很难同时分析多种成分,对结构类似的化合物有一定程度的交叉,分析分子量很小的化合物和不稳定的化合物有一定的困难。
用酶免疫分析方法试剂盒检测地表水、地下水中的四环素和泰勒菌素,检测分别为0.05μg/L,0.1μg/L。其结果表明,该方法成本低、检测快,可用于水中的四环素、氯四环素、泰勒菌素的初筛检测。
毛细管电泳法
毛细管电泳法是离子或荷电粒子以电场为驱动力在毛细管中按其速度或分配系数不同进行高效分离分析大的新技术。毛细管具有良好的散热效能,可允许在毛细管两端加上高电压的,因此毛细管电泳法反应快,分离效力高的优点。
放射免疫测定法
经典的放射免疫测定基本原理和酶免疫分析是相同的,但所不同的是反应的放大指示系统不是酶和底物,而是放射性同位素。用于抗原或抗体标记的同位素通常是放射性较小的β放射原,最常用的是同位素是3H和14C,放射性不强、用量也极微小,比较安全。
发展趋势
国内外使用最广泛的还是液相色谱法及其联用技术。高效液相色谱具有灵敏度高、精确度高、分析效力高以及检测限低、特异性强的优点,同时也存在仪器昂贵、操作繁琐、需要专业的分析操作人员、样品处理复杂、成本高的缺点。所以,该种方法很难成为一种常规检测技术。人们也在尝试着将一些新的方法引进到畜禽废水抗生素的检测中,例如,酶免疫分析方法和毛细管电泳分析方法等。酶免疫分析方法具有简便、灵敏、快速以及成本低的优点,但是其检测的结果还要通过MS的验证才能确证,而且国内对试剂盒的使用主要还是从国外进口,价格昂贵。我国是一个农业大国,畜禽养殖业正在从分散式向集约化模式转变,畜禽养殖废水量不断的增长,抗生素对周围水体的污染将会更加的严重。现有的检测技术还不能完全检测到水体中的各种类的抗生素,所以随着科学技术发展以及社会对畜禽废水中抗生素污染的重视,一种简便、快速、准确、高效以及廉价的检测方法,将是我国今后研究和开发的目标。
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