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血清碱性磷酸酶

磷酸单酯水解酶

碱性磷酸酶（ALP）属磷酸单酯水解酶，是一组特异的磷酸酯酶。该酶广泛分布于人体组织和体液，以骨、肝、乳腺、小肠、肾中含量较高，其大部分由骨细胞产生，小部分来自肝，经胆汁排入肠道。ALP测定方法主要是比色法和连续监测法。

辨别原理
（1）比色法：ALP在碱性条件下使磷酸苯二钠水解，生成磷酸和游离酚，后者与4-氨基安替比林作用，并经铁氰化钾氧化成红色醌类化合物，其颜色的深浅与ALP活性成正比。
（2）连续监测法：ALP在碱性条件下，使磷酸对硝基苯酚（4-NPP）释放出磷酸基团，AMP参与磷酸酰基的转移，促进酶反应速率，生成游离的对硝基苯酚（4-NP），并形成黄色的醌，其吸光度的增高速率与酶活力成正比。
试剂
比色法
①0.1mol/L碳酸盐缓冲液（pH10.0）：称取无水碳酸钠6.36g，碳酸氢钠3.36g，4-氨基安替比林1.5g，溶于800ml蒸馏水中，移入1000ml容量瓶内，加蒸馏水至刻度，置棕色瓶内保存。
②20mmol/L磷酸苯二钠溶液：称取磷酸苯二钠（AR）2.18g，迅速加入已煮沸的500ml蒸馏水中，冷却后加入氯仿2ml防腐，冰箱保存。此为基质液。
③铁氰化钾溶液：称取铁氰化钾2.5g，硼酸17g，分别溶于400ml蒸馏水中，混合后加水至1000ml，置棕色瓶内避光保存。出现蓝绿色应弃去。
④酚标准贮存液（1mg/ml）：称取重蒸馏酚1.0g，溶于0.1mol/L盐酸中，并加至1000ml刻度。也可购买标准液。
⑤酚标准应用液（0.05mg/ml）：取酚标准贮存液5ml，加蒸馏水至100ml。
连续监测法
①1.8mol/L AMP缓冲液（pH10.3）：称取2-氨基-2甲基-1-丙醇（AMP，MW89.14）160g，加1mol/L盐酸320ml混合，加500ml新煮沸已凉的蒸馏水，调pH至10.3±0.02（30℃），并加上述蒸馏水至1000ml，置紧塞瓶中于冰箱保存。
②10.5mmol/L氯化镁溶液：称取氯化镁（MgCl2·6H2O，MW20 3.31）0.21g，溶于水中，并稀释至100ml，室温保存。
③31.5mmol/L磷酸对硝基苯酚溶液（4-NPP）：称磷酸对硝基苯酚二钠盐（含6分子水，MW 371.15）120.8mg，溶于100ml蒸馏水中，置棕色瓶内于冰箱保存。
④底物缓冲液（0.84mol/L AMP，15mmol/L 4-NPP，0.5mmol/L MgCl2，pH10.3）将AMP、4-NPP和MgCl23种溶液按10∶10∶1混合，37℃预温待用。
正常值
(1)酶速率法(37℃)：
成人：40～160U/L；
儿童：<350U/L；
(2)磷酸苯二钠法：
成人：3～13Kat单位；
儿童：5～30kat单位；
(3)动态法：成人：20~110U/L；
青少年：
1.男性：<750U/L；
2.女性：<500U/L；
儿童：<500U/L；
婴儿：50~240U/L。
(注：具体参考值请根据各实验室而定。)
临床意义
(1)升高：
①无黄疸：肝硬化、肝细胞癌、胆管疾病(胆管癌，肝内结石)、局限性肝损害(转移性肝癌、肝脓疡、肉芽肿性肝损伤)、其他肝疾病(慢性肝炎、脂肪肝)、骨疾病(佝偻病骨软化症、或骨肉瘤)、转移性骨癌、甲状腺功能亢进症，甲状旁腺功能亢进症，慢性肾功能不全，恶性肿瘤(骨、肝转移)等。
②有黄疸：病毒性肝炎、酒精性肝炎、药物性肝损害、肝炎病毒以外的病毒引起的肝损害、原发性胆汁性肝硬化、其他肝内胆汁瘀滞、阻塞性黄疸(胆管癌、胆管细胞癌、胰头癌，总胆管结石，硬化性胆管炎)。
(2)降低：牛奶-碱综合征、坏血病、甲状腺功能减退症、维生素D摄入过多、恶性贫血、重症慢性肾炎、呆小病、恶病质等。
偏高原因
代谢异常原因
碱性磷酸酶主要用于阻塞性黄疸、肝癌、胆汁淤积性肝炎等的检查，阻塞性黄疸、原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎都会使碱性磷酸酶偏高。
胆道排泄异常
碱性磷酸酶是需要经过肝脏，然后由胆汁排出，当排泄过程中出现异常，那就会引起碱性磷酸酶偏高。
骨骼组织原因
由于骨组织中此酶亦很活跃。因此，孕妇、骨折愈合期、骨软化症。佝偻病、骨细胞癌、骨质疏松等血清碱性磷酸酶会升高。
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